色譜層析柱應該如何確定上樣量
更新時間：2020-07-29 點擊次數：1531次
色譜層析柱產品專為生物色譜開發，兩端可調活塞支持了經典正相和反相色譜轉向生物色譜的應用。通過快速緊鎖式系統能迅速的對柱進行打開和裝填密封，也能方便的拆卸進行零部件清洗。通過使用SP系列色譜柱，可以在藥物研發的早期階段更快、更簡便地評估各種填料性并獲取必要的放大數據。
在做層析實驗的時候可能時常會遇到一個問題：一次實驗可以上多少樣品呢？多也不是少也不是，上樣多了會造成一部分樣品損失或者達不到預期的分離效果，上樣少了無法充分使用色譜層析柱還要增加重復實驗或者使用更大層析柱，真是件糾結的事情。我們今天要來給大家介紹的就是不同的色譜層析柱應該如何確定上樣量。
色譜層析柱樣品用量大，可加大柱的直徑，一般制備用凝膠柱，直徑大于2厘米，但在加樣時應將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外，直徑加大，洗脫液體體積增大，樣品稀釋度大。分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱床必須有適宜的高度，分離度與柱高的平方根相關，但由于軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞，一般不超過1米。
此外，直徑加大，洗脫液體體積增大，樣品稀釋度大。分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱床必須有適宜的高度，分離度與柱高的平方根相關，但由于軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞，一般不超過1米。
分族分離時用短柱，一般凝膠柱長20-30厘米，柱高與直徑的比較5:1─10:1，凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。分級分離時柱高與直徑之線為20:1─100:1，常用凝膠柱有50×25厘米，10×25厘米。
